دوره 32، شماره 293: هفته دوم شهریورماه 1393:1081-1092

مهار رشد رده‌ی سرطانی 562K در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از فراکشن‌های پروتئینی دیواره‌ی سلولی پروبیوتیک‌های لاكتوباسیلوس كازئی و لاکتوباسیلوس پاراكازئی

مرضیه باقری, مهدی محمدزاده, امیر توکمه‌چی

چکیده


قدمه: این تحقیق به منظور بررسی تاثیر فراکشن‌های پروتئین با وزن مولکولی بالا و پایین به دست آمده از دیواره‌ی سلولی پروبیوتیک‌های لاكتوباسیلوس كازئی و لاكتوباسیلوس پاراكازئی بر رشد رده‌ی سرطانی 562K در شرایط آزمایشگاهی انجام گرفت.

روش‌ها: ابتدا باكتری‌ها در محیط كشت اختصاصی و در شرایط بی‌هوازی كشت و پس از شستشو با بافر PBS (Phosphate buffered saline) به كمك دستگاه سونیكاتور، شكسته و جهت جدا كردن دیواره‌ی سلولی از سایر تركیبات سانتریفیوژ شد. سپس، برای رسوب پروتئین‌های دیواره‌ از اسید تری کلرو استیک 72 درصد و داگزالات سدیم 15 درصد استفاده شد. آن گاه، غلظت‌های πg/ml 500، 1000، 2000، 3000 و 4000 از رسوب پروتئین دیواره‌ی سلولی باكتری‌ها به طور جداگانه در محیط كشت سلولی تهیه و خواص سلول‌كشی آن‌ها علیه رده‌ی سرطانی 562K در شرایط آزمایشگاهی در زمان‌های 12، 24، 48 و 72 ساعت با تراکم 10000 سلول در چاهک به روش رنگ‌سنجی MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] سنجیده شد.

یافته‌ها: فراکشن‌های پروتئینی با وزن مولکولی بالا و وزن مولکولی پایین دیواره‌ی سلولی هر دو پروبیوتیک، قادرند به طور معنی‌داری (046/0 = P) رشد رده‌ی سرطانی 562K را مهار سازند.

نتیجه‌گیری: استفاده از فراکشن‌های پروتئینی با وزن مولکولی بالا در هر دو پروبیوتیک لاکتوباسیلوس پاراکازئی و لاکتوباسیلوس کازئی نسبت به فراکشن‌های پروتئین با وزن مولکولی پایین دارای اثرات ضد سرطانی بیشتری می‌باشد. همچنین فراکشن‌های پروتئینی دیواره‌ی سلولی پروبیوتیک لاکتوباسیلوس پاراکازئی نسبت به لاکتوباسیلوس کازئی دارای درصد سلول‌کشی بیشتری می‌باشد.


واژگان کلیدی


لاکتوباسیلوس کازئی؛ لاکتوباسیلوس پاراکازئی؛ فراکشن پروتئینی؛ دیواره‌ی سلولی؛ رده‌ی سرطانی 562K

تمام متن:

PDF

مراجع


Schrezenmeir J, de VM. Probiotics, prebiotics, and synbiotics--approaching a definition. Am J Clin Nutr 2001; 73(2 Suppl): 361S-4S.

de Roos NM, Katan MB. Effects of probiotic bacteria on diarrhea, lipid metabolism, and carcinogenesis: a review of papers published between 1988 and 1998. Am J Clin Nutr 2000; 71(2): 405-11.

Willett W. The search for the causes of breast and colon cancer. Nature 1989; 338(6214): 389-94.

Hashemi M, Kroczak TJ. Apoptosis and autoimmune disease. Current Medicinal Chemistry 2005; 4(4): 429-37.

Schar-Zammaretti P, Dillmann ML, D'Amico N, Affolter M, Ubbink J. Influence of fermentation medium composition on physicochemical surface properties of Lactobacillus acidophilus. Appl Environ Microbiol 2005; 71(12): 8165-73.

Juarez Tomas MS, Ocana VS, Wiese B, Nader-Macias ME. Growth and lactic acid production by vaginal Lactobacillus acidophilus CRL 1259, and inhibition of uropathogenic Escherichia coli. J Med Microbiol 2003; 52(Pt 12): 1117-24.

Bromberg R, Moreno I, Zaganini CL, Delboni RR, Delboni RR. Isolation of bacteriocin-producing lactic acid bacteria from meat and meat products and its spectrum of inhibitory activity. Braz J Microbiol 2004; 35(1-2): 137-44.

Gill HS, Rutherfurd KJ, Prasad J, Gopal PK. Enhancement of natural and acquired immunity by Lactobacillus rhamnosus (HN001), Lactobacillus acidophilus (HN017) and Bifidobacterium lactis (HN019). Br J Nutr 2000; 83(2): 167-76.

Wollowski I, Rechkemmer G, Pool-Zobel BL. Protective role of probiotics and prebiotics in colon cancer. Am J Clin Nutr 2001; 73(2 Suppl): 451S-5S.

Rafter J. The effects of probiotics on colon cancer development. Nutr Res Rev 2004; 17(2): 277-84.

Hehlmann R, Hochhaus A, Baccarani M. Chronic myeloid leukaemia. Lancet 2007; 370(9584): 342-50.

Ekert H, Jurk IH, Waters KD, Tiedemann K. Prophylactic co-trimoxazole and lactobacilli preparation in neutropenic patients. Med Pediatr Oncol 1980; 8(1): 47-51.

Choi SS, Kim Y, Han KS, You S, Oh S, Kim SH. Effects of Lactobacillus strains on cancer cell proliferation and oxidative stress in vitro. Lett Appl Microbiol 2006; 42(5): 452-8.

Kabiri F, Nejati V, Tukmechi A, Delirezh N, Nikbakhsh P. Inhibitiory properties of cytoplasmic extract of Lactobacilli isolated from common carp intestine on human chronic myelocytic leukemia K562 cell line: an in vitro study. Tehran Univ Med J 2011; 68(12): 691-8. [In Persian].

Azizpour K. Biochemical characterization of lactic acid bacteria isolated from rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) of West Azarbaijn, Iran. Res J Biol Sci 2009; 4(3): 324-6.

Sanchez B, Schmitter JM, Urdaci MC. Identification of novel proteins secreted by Lactobacillus rhamnosus GG grown in de Mann-Rogosa-Sharpe broth. Lett Appl Microbiol 2009; 48(5): 618-22.

Kruger NJ. The Bradford method for protein quantitation. In: Walker JM, editor. The protein protocols handbook. Totowa, NJ: Humana Press; 1996. p. 11-5.

Fisher L. Experimental and technique in column of gel filterasion choromatography. In: Fisher L, Editor. Gel filterasion choromatography. 2nd ed. Philadelphia, PA: Elsevier Publication; 1980. p. 81-137.

Tsai YT, Cheng PC, Fan CK, Pan TM. Time-dependent persistence of enhanced immune response by a potential probiotic strain Lactobacillus paracasei subsp. paracasei NTU 101. Int J Food Microbiol 2008; 128(2): 219-25.

Biffi A, Coradini D, Larsen R, Riva L, Di FG. Antiproliferative effect of fermented milk on the growth of a human breast cancer cell line. Nutr Cancer 1997; 28(1): 93-9.

Fichera GA, Giese G. Non-immunologically-mediated cytotoxicity of Lactobacillus casei and its derivative peptidoglycan against tumor cell lines. Cancer Lett 1994; 85(1): 93-103.

Iyer C, Kosters A, Sethi G, Kunnumakkara AB, Aggarwal BB, Versalovic J. Probiotic Lactobacillus reuteri promotes TNF-induced apoptosis in human myeloid leukemia-derived cells by modulation of NF-kappaB and MAPK signalling. Cell Microbiol 2008; 10(7): 1442-52.

Roy MK, Kuwabara Y, Hara K, Watanabe Y, Tamai Y. Peptides from the N-terminal end of bovine lactoferrin induce apoptosis in human leukemic (HL-60) cells. J Dairy Sci 2002; 85(9): 2065-74.

Bossi G, Lapi E, Strano S, Rinaldo C, Blandino G, Sacchi A. Mutant p53 gain of function: reduction of tumor malignancy of human cancer cell lines through abrogation of mutant p53 expression. Oncogene 2006; 25(2): 304-9.

Singhal N, Bapsy PP, Babu KG, George J. Chronic myeloid leukemia. J Assoc Physicians India 2004; 52: 410-6.

Rosca A, Arion C, Colita A, Nedelcu L, Scirneciu C, Andreescu O, et al. Chronic myelogenous leukemia prognosis and evolution. Bulletin of the Transilvania University of Brasov 2009; 2(51): 97-104.

Quintas-Cardama A, Cortes JE. Chronic myeloid leukemia: diagnosis and treatment. Mayo Clin Proc 2006; 81(7): 973-88.

Valent P. Imatinib-resistant chronic myeloid leukemia (CML): Current concepts on pathogenesis and new emerging pharmacologic approaches. Biologics 2007; 1(4): 433-48.

Goldman JM. Initial treatment for patients with CML. Hematology Am Soc Hematol Educ Program 2009; 453-60.




Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0

This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 Unported License which allows users to read, copy, distribute and make derivative works for non-commercial purposes from the material, as long as the author of the original work is cited properly.