%0 Journal Article %T بیان پروتئین M2 ویروس آنفلوانزای انسانی H1N1 در باکتری اشریشیا کلی %J مجله دانشکده پزشکی اصفهان %I دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی-درمانی استان اصفهان %Z 1027-7595 %A علوی اصفهانی, سید محمد علی %A فتوحی, فاطمه %A قائمی, امیر %A صالح, مریم %A چلبیانی, سیاوش %A فرهمند, بهرخ %A توسطی خیری, معصومه %D 2013 %\ 01/20/2013 %V 30 %N 216 %P 2091-2102 %! بیان پروتئین M2 ویروس آنفلوانزای انسانی H1N1 در باکتری اشریشیا کلی %R %X مقدمه: پروتئین M2 که یک پروتئین هوموتترامر متصل به غشا با پیوند دی‌سولفیدی می‌‌باشد، در میان همه‌ی ویروس‌های آنفلوانزای A به طور کامل حفاظت شده است. به همین دلیل هدف مناسبی برای توسعه‌ی واکسن آنفلوانزا با محافظت وسیع‌الطیف می‌باشد. در این مطالعه پروتئین M2 ویروس آنفلوانزای A در سیستم پروکاریوتی بیان شد. روش‌ها: ژن پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا [A/NewCaledonia/20/99 (H1N1)] پس از تکثیر به روش PCR (Polymerase chain reaction) با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و هضم آنزیمی، در وکتور بیانی پروکاریوتی pQE30 جای‌سازی گردید. پلاسمید نوترکیب pQE30-M2 به سلول مستعد‌ شده E.coli سویه‌ی M15 منتقل شد و سلول‌ها در محیط LB مایع واجد آمپی‌سیلین و کانامایسین بعد از القا با IPTG (Isopropyl thiogalactoside) به صورت کشت شبانه رشد کردند. بیان پروتئین M2 به وسیله‌ی الکتروفورز روی ژل آکریل آمید و سپس Western blot تأیید شد. یافته‌ها: نتایج کلونی PCR و هضم آنزیمی و تعیین توالی نشان داد که ژن M2 در وکتور pQE30 به طور صحیح و در قاب خواندنی دنباله‌ی هیستیدینی کلون شد و تولید پروتئین نوترکیب با استفاده از آنتی‌بادی اختصاصی ضد پروتئین M2 به روش Western blot تأیید گردید. نتیجه‌گیری: آزمایشات نشان داد که واکسن‌های بر پایه‌ی M2 باعث القای ایمنی وسیع‌الطیف می‌شوند و می‌توانند حیوانات را در برابر چالش کشنده تحت تیپ‌های چند گانه‌ی ویروس، محافظت نماید. بنابراین پروتئین M2 پس از تخلیص می‌تواند به عنوان یک کاندید واکسن در نظر گرفته شود و در مطالعات آینده همراه با ادجوانت‌های مختلف در مدل‌های حیوانی مورد ارزیابی قرار گیرد. واژگان کلیدی: پروتئین M2، واکسن، بیان پروتئین، ویروس آنفلوانزا، اشریشیا کلی %U https://jims.mui.ac.ir/article_13955_e192e29dc0cf5ecc71d764d856f37c0d.pdf