%0 Journal Article %T ساخت و ارزیابی یک سازه‌ی DNA بیان‌کننده‌ی پروتئین Core ویروس هپاتیت C متصل به آنتی‌ژن S ویروس هپاتیت B به عنوان یک کاندید واکسن %J مجله دانشکده پزشکی اصفهان %I دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی-درمانی استان اصفهان %Z 1027-7595 %A یزدانیان, مریم %A معمارنژادیان, آرش %A خان احمد شهرضا, حسین %A سلیمانجاهی, حوریه %A متولی, فاطمه %A روحوند, فرزین %D 2013 %\ 03/21/2013 %V 31 %N 226 %P 150-160 %! ساخت و ارزیابی یک سازه‌ی DNA بیان‌کننده‌ی پروتئین Core ویروس هپاتیت C متصل به آنتی‌ژن S ویروس هپاتیت B به عنوان یک کاندید واکسن %K ویروس هپاتیت C %K پروتئین Core %K واکسن DNA %K آنتی‌ژن HBs %K پاسخ‌های سیتوتوکسیک %K سلول‌های لنفوسیتی T %R %X مقدمه: با وجود این که ویروس هپاتیت C (Hepatitis C virus یا HCV) یکی از عوامل مهم ایجاد‌کننده‌ی بیماری‌های مزمن کبدی می‌باشد، هنوز واکسن مناسبی برای آن تهیه نشده است. هدف از این مطالعه، ساخت یک سازه‌ی بیان‌کننده‌ی توالیCore (aa: 1-122)  ویروس هپاتیت C متصل به آنتی‌ژن S ویروس هپاتیت B (HBsAg یا Hepatitis B surface antigen) و تأیید بیان آن در سلول‌های یوکاریوتی بود.روش‌ها: در ابتدا توالی Core این ویروس با استفاده از پرایمرهای دارای جایگاه برش آنزیمی BamHI/EcoRV از روی وکتور pIVEX2.4a حاوی این ژن تکثیر شد و در وکتور pCDNA3.1 حاوی HBsAg خطی‌شده با آنزیم‌های مذکور کلون گردید. ارزیابی و تأیید ساختار نوترکیب به وسیله‌ی برش آنزیم‌های محدودکننده و در  نهایت تعیین توالی صورت گرفت. پلاسمید ساخته‌شده‌ی نهایی (pCHCORE) در رده‌ی سلولی HEK293T ترانسفکت شد و ارزیابی نهایی بیان توسط تست Western blot بر روی سلول‌های HEK293T ترانسفکت‌ شده به وسیله‌ی آنتی‌بادی پلی‌کلونال آنتی HBsAg موشی انجام شد.یافته‌ها: توالی ژن (122-1)Core  ویروس هپاتیت C با موفقیت تکثیر گردید و نتایج ارزیابی، برش آنزیمی و تعیین توالی تأییدکننده‌ی صحت ساختار نوترکیب pCHCORE و کلونینگ انجام ‌شده بود. نتیجه‌ی Western blot بیانگر انتقال موفق پلاسمید و بیان ژن هدف در سلول‌های یوکاریوتی بود.نتیجه‌گیری: با توجه به ساخت و بیان موفقیت‌آمیز ساختار HBS-core در سلول‌های یوکاریوتی و به دلیل احتمال افزایش پاسخ‌های ایمنی توسط آنتی‌ژن HBS به صورت فیوژن با پروتئین Core (بر اساس تحقیقات قبلی)، سازه‌ی بیانی حاوی ژن Core ویروس هپاتیت C متصل ‌شده به این آنتی‌ژن، ممکن است باعث القای بیشتر پاسخ‌های ایمنی علیه پروتئین Core شود و بتواند به عنوان واکسن مؤثر به منظور کنترل عفونت HCV به کار رود. %U https://jims.mui.ac.ir/article_14020_886f9d6ed2d4bc231b9a18960f9bd4b0.pdf