بررسی خصوصیت مولکولی ایزوله‌های بالینی Leishmania Major دارای ناحیه‌ی ITS1 مشابه با گونه‌های Crithidia

نوع مقاله : مقاله کوتاه

نویسندگان

1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه انگل‌شناسی و قارچ‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی و مرکز تحقیقات سلامت و ایمنی غذا، دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد، یزد، ایران

2 دانشیار، گروه انگل‌شناسی و قارچ‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی و مرکز تحقیقات سلامت و ایمنی غذا، دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد، یزد، ایران

3 دانشیار، گروه بیوتکنولوژی، دانشکده‌ی علوم زیستی و بیوتکنولوژی، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران

4 دانشیار، گروه انگل‌شناسی و قارچ‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد، یزد، ایران

5 مرکز تحقیقات سلامت و ایمنی غذا، دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد، یزد، ایران

6 استاد، آزمایشگاه تکنولوژی اطلاعات و ارتباطات و مهندسی الکترونیک، دانشگاه تونس، تونس، تونس

چکیده

مقدمه: لیشمانیوز توسط تک‌یاخته‌ای از جنس Leishmania ایجاد می‌شود. تعدادی از ایزوله‌های این انگل در مناطقی از ایران دارای الگوی متفاوتی از ITS1 و مشابه انواع گونه‌های Crithidia هستند. بنابراین، در این مطالعه به بررسی مولکولی این ایزوله‌ها پرداخته شد.روش‌ها: از ایزوله‌های دارای ITS1 مشابه با انواع گونه‌های Crithidia، DNA ژنومی استخراج شد. تکثیر با استفاده از پرایمر اختصاصی 13A/13B صورت گرفت و در ادامه، توالی‌یابی شد. توالی‌های دریافتی از طریق BLASTn و Multiple alignment، T-Coffee و Vector NTI مورد بررسی قرار گرفت. جهت گروه‌بندی و بررسی وضعیت ایزوله‌ها، از درخت فیلوژنی استفاده گردید.یافته‌ها: بررسی توالی‌های به دست آمده، مشخص نمود که هتروژنیسیتی کمی بین ایزوله‌های مورد بررسی وجود دارد، اما هتروژنیسیتی بین این ایزوله‌ها و ایزوله‌های موجود در بانک‌ها قابل توجه است. بنابراین، ایزوله‌ها در گروه‌بندی مجزایی قرار گرفتند. همچنین، با وجود این که ناحیه‌ی ITS1 این ایزوله‌ها مشابه با Crithidia بود، اما ناحیه‌ی 13A/13B موجود روی میتوکندری مشابه با انواع گونه‌های Leishmania بود.نتیجه‌گیری: از آن جایی که انگل Crithidia به عنوان انگلی تک میزبانه گزارش شده است و انسان نمی‌تواند میزبان مناسبی برای این انگل باشد، حضور ژن‌های آن در انگل‌های مسبب لیشمانیوز جلدی، می‌تواند ناشی از ملاقات قبلی این دو انگل در یک میزبان مشترک یعنی پشه‌ی خاکی باشد. از آن جایی که تا به حال هیچ تکثیر جنسی در جنس Leishmania گزارش نشده است، احتمال وجود پدیده‌ی نوترکیبی وجود دارد.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Molecular Characterization of Clinical Leishmania Major Isolates Harboring ITS1 Homology Similar to the One in Crithidia spp.

نویسندگان [English]

  • Mina Aghai-Maybodi 1
  • Gilda Eslami 2
  • Masoud Tohidfar 3
  • Ali Fattahi Bafghi 4
  • Saeedeh Sadat Hosseini 5
  • Salman Ahmadian 1
  • Mourad Elloumi 6
1 MSc Student, Department of Parasitology and Mycology, School of Medicine AND Research Center for Food Hygiene and Safety, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
2 Associate Professor, Department of Parasitology and Mycology, School of Medicine AND Research Center for Food Hygiene and Safety, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
3 Associate Professor, Department of Biotechnology, School of Life Science and Biotechnology, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran
4 Associate Professor, Department of Parasitology and Mycology, School of Medicine, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
5 Research Center for Food Hygiene and Safety, Shahid Sadoughi University of Medical Sciences, Yazd, Iran
6 Professor, Laboratory of Technologies of Information and Communication and Electrical Engineering (LaTICE), University of Tunis, Tunis, Tunisia
چکیده [English]

Background: Leishmaniasis is caused by the protozoan Leishmania spp. In some loci from Iran, some isolates have ITS1 like the one in Crithidia spp. Therefore, in this study, we analyzed molecular characters of the mentioned isolates.Methods: DNA was extracted from all clinical isolates harboring ITS1 like the one in Crithidia spp. Amplification was performed using the specific primer pair of 13A/13B and followed by sequencing. The sequences were assessed using BLASTn, multiple alignment, T-coffee, and Vector NTI. Phylogenic tree was used for grouping and analyzing the isolates.Findings: Sequencing analyzing showed low heterogeneity among the mentioned isolates, but high heterogeneity between the mentioned isolates and the ones in genbank, therefore the mentioned isolates were grouped separately. Moreover, although ITS1 from the mentioned isolates were homolog to the ones in Crithodia spp., but 13A/13B loci on mitochondria showed homology with Leishmania.Conclusion: As Crithidia is a monoxenous, and its natural host is flies, finding its genes in the agents of cutaneous leishmaniasis may show these parasites may meet each other in sandfly. Till now, no sexual reproduction has been reported in Leishmania spp., therefore it is likely recombinant.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Crithidia
  • Leishmania major
  • Leishmaniasis
  • Cutaneous

مراجع

  1. Eslami G, Hajimohammadi B, Jafari AA, Mirzaei F, Gholamrezai M, Anvari H, et al. Molecular identification of Leishmania tropica infections in patients with cutaneous leishmaniasis from an endemic central of Iran. Trop Biomed 2014; 31(4): 592-9.
  2. Mouttaki T, Morales-Yuste M, Merino-Espinosa G, Chiheb S, Fellah H, Martin-Sanchez J, et al. Molecular diagnosis of cutaneous leishmaniasis and identification of the causative Leishmania species in Morocco by using three PCR-based assays. Parasit Vectors 2014; 7: 420.
  3. Mogalli NM, El Hossary SS, Khatri ML, Mukred AM, Kassem HA, El Sawaf BM, et al. Clinicoepidemiologic pattern of cutaneous leishmaniasis and molecular characterization of its causative agent in Hajjah governorate, northwest of Yemen. Acta Trop 2016; 163: 130-4.
  4. Hejazi H, Eslami G, Dalimi A. The parasiticidal effect of electricity on Leishmania major, both in vitro and in vivo. Ann Trop Med Parasitol 2004; 98(1): 37-42.
  5. Fotouhi-Ardakani R, Dabiri S, Ajdari S, Alimohammadian MH, AlaeeNovin E, Taleshi N, et al. Assessment of nuclear and mitochondrial genes in precise identification and analysis of genetic polymorphisms for the evaluation of Leishmania parasites. Infect Genet Evol 2016; 46: 33-41.
  6. Boughattas S, Salehi R. Molecular approaches for detection and identification of foodborne pathogens. J Food Qual Hazards Control 2014; 1(1): 1-6.
  7. Hajimohammadi B, Eslami G, Oryan A, Zohourtabar A, Pourmirzaei TH, Moghaddam AM. Molecular identification of Sarcocystis hominis in native cattle of central Iran: A case report. Trop Biomed 2014; 31(1): 183-6.
  8. Khosravi S, Hejazi SH, Hashemzadeh M, Eslami G, Darani HY. Molecular diagnosis of Old World leishmaniasis: real-time PCR based on tryparedoxin peroxidase gene for the detection and identification of Leishmania spp. J Vector Borne Dis 2012; 49(1): 15-8.
  9. Lopes EG, Geraldo Junior CA, Marcili A, Silva RD, Keid LB, Oliveira TM, et al. Performance of conventional PCRS based on primers directed to nuclear and mitochondrial genes for the detection and identification of Leishmania spp. Rev Inst Med Trop Sao Paulo 2016; 58: 41.
  10. Eslami G, Salehi R, Khosravi S, Doudi M. Genetic analysis of clinical isolates of Leishmania major from Isfahan, Iran. J Vector Borne Dis 2012; 49(3): 168-74.
  11. Zheng X, Hu X, Chen J. Analysis of kinetoplast DNA of Leishmania isolates in China by PCR-SSCP. Zhongguo Ji Sheng Chong Xue Yu Ji Sheng Chong Bing Za Zhi 1999; 17(6): 346-9. [In Chinese].
  12. Rodgers MR, Popper SJ, Wirth DF. Amplification of kinetoplast DNA as a tool in the detection and diagnosis of Leishmania. Exp Parasitol 1990; 71(3): 267-75.
  13. Lachaud L, Marchergui-Hammami S, Chabbert E, Dereure J, Dedet JP, Bastien P. Comparison of six PCR methods using peripheral blood for detection of canine visceral leishmaniasis. J Clin Microbiol 2002; 40(1): 210-5.
  14. Bensoussan E, Nasereddin A, Jonas F, Schnur LF, Jaffe CL. Comparison of PCR assays for diagnosis of cutaneous leishmaniasis. J Clin Microbiol 2006; 44(4): 1435-9.
  15. Azmi K, Nasereddin A, Ereqat S, Schnur L, Schonian G, Abdeen Z. Methods incorporating a polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism and their use as a 'gold standard' in diagnosing Old World cutaneous leishmaniasis. Diagn Microbiol Infect Dis 2011; 71(2): 151-5.
  16. Rogers WO, Wirth DF. Kinetoplast DNA minicircles: regions of extensive sequence divergence. Proc Natl Acad Sci USA 1987; 84(2): 565-9.
  17. Sharifi-Rad M, Dabirzadeh M, Sharifi I, Babaei Z. Leishmania major: Genetic Profiles of the Parasites Isolated from Chabahar, Southeastern Iran by PPIP-PCR. Iran J Parasitol 2016; 11(3): 290-5.
  18. Kelly JM, Law JM, Chapman CJ, Van Eys GJ, Evans DA. Evidence of genetic recombination in Leishmania. Mol Biochem Parasitol 1991; 46(2): 253-63.
  19. Rougeron V, De Meeus T, Banuls AL. Reproduction in Leishmania: A focus on genetic exchange. Infect Genet Evol 2017; 50: 128-32.
  20. Eslami G, Frikha F, Salehi R, Khamesipour A, Hejazi H, Nilforoushzadeh MA. Cloning, expression and dynamic simulation of TRYP6 from Leishmania major (MRHO/IR/75/ER). Mol Biol Rep 2011; 38(6): 3765-76.
مجله دانشکده پزشکی اصفهان
دوره 36، شماره 500 - شماره پیاپی 500
آذر و دی 1397
صفحه 1261-1266

فایل ها

سابقه مقاله

  • تاریخ دریافت: 26 خرداد 1397
  • تاریخ بازنگری: 12 آبان 1403
  • تاریخ پذیرش: 17 فروردین 1401

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار