بررسی تأثیر miRNA Mimic hsa-miR-7704 بر تکثیر ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 در کشت سلولی

نوع مقاله : مقاله های پژوهشی

نویسندگان

1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه میکروب‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

2 استاد، گروه میکروب‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

3 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه میکروب‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کاشان، کاشان، ایران

4 دانشیار، گروه میکروب‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

5 دانشجوی دکتری، گروه میکروب‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

6 دانشیار، گروه ژنتیک و بیولوژی ملکولی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

چکیده

مقدمه: ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 (Herpes simplex virus 1 یا HSV-1)، از شایع‌ترین ویروس‌های بیماری‌زا در جمعیت‌های انسانی ‌است. این ویروس، طیف وسیعی از عفونت‌های بدون‌ علایم تا کشنده را به خصوص در افراد دچار نقص سیستم ‌ایمنی ایجاد می‌کند. تعداد محدودی دارو برای درمان عفونت‌های ناشی از HSV-1 وجود دارد.آسیکلوویر، یکی از مهم‌ترین این داروها می‌باشد. استفاده‌ی بیش از حد از این دارو، منجر به ‌پیدایش سویه‌های مقاوم‌ شده ‌است. از این رو، روش‌های جایگزین با مکانیسم اثر متفاوت ضروری به نظر می‌رسد. هدف از انجام این مطالعه، استفاده از MicroRNAها به عنوان روشی نوین در مهار تکثیر HSV-1 بود.روش‌ها: در این مطالعه، miRNA Mimic hsa-miR-7704 (miR-SX1) سنتز شده به‌ درون سلول‌های Hela ترانسفکت ‌شد و سپس، توسط ویروس HSV-1 آلوده ‌گردید. تغییرات سلولی، 24 ساعت پس از آلودگی با میکروسکوپ اینورت مشاهده و عکس‌برداری شد. تیتر ویروسی با روش میزان دوز کشنده‌ی 50 درصد (50% Tissue Culture Infective Dose یا TCID50) سنجیده شد.یافته‌ها: سلول‌های ترانسفکت ‌شده با miR-SX1 تیتر کمتری از ویروس HSV-1 داشتند؛ بدون این که تأثیری بر میزان زنده ماندن سلول‌ها داشته باشد.نتیجه‌گیری: miR-SX1، از رشد ویروس HSV-1 جلوگیری می‌کند و می‌تواند به‌ عنوان مکانیسم جایگزین برای درمان عفونت‌های ناشی از این ویروس به‌کار برود.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

The Effect of miRNA Mimic hsa-miR-7704 on in-Vitro Replication of Herpes Simplex Virus Type 1

نویسندگان [English]

  • Mehdi Shabani 1
  • Bahram Nasr-Esfahani 2
  • Bahar Sadegh-Ehdaei 3
  • Sharareh Moghim 4
  • Arezoo Mirzaei 5
  • Mohammad Reza Sharifi 6
1 MSc Student, Department of Microbiology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
2 Professor, Department of Microbiology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
3 MSc Student, Department of Microbiology, School of Medicine, Kashan University of Medical Sciences, Kashan, Iran
4 Associate Professor, Department of Microbiology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
5 PhD Candidate, Department of Microbiology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
6 Associate Professor, Department of Genetics and Molecular Biology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
چکیده [English]

Background: Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) infections are of the most common diseases in human population. HSV-1 can cause subclinical to severe diseases, especially in immunocompromised patients. There are few anti-herpes drugs for treatment of HSV-1 infection. Acyclovir is one of the most important drugs. The extensive use of this drug has led to the development of resistant strains. Therefore, development of new anti- herpes drugs with different mechanisms is noticeable. This study aimed to use microRNAs as a novel method for inhibiting HSV-1 infection.Methods: Synthesized miRNA mimics hsa-miR-7704 (miR-SX1) were transfected into Hela cells, and then infected with HSV-1. Cellular morphological changes were observed 24 hours post-infection by inverted microscope, and photographed. Viral titers were measured using 50% tissue culture infective dose (TCID50) method.Findings: miR-SX-1-transfected cells produced low-titer HSV-1, without affecting cell viability.Conclusion: The data suggest that miR-SX1 inhibits HSV-1 replication, and may provide an alternative mechanism to prevent HSV-1 infection.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Herpes simplex virus 1
  • microRNA
  • Antiviral
  • Therapy
  1. Arduino PG, Porter SR. Herpes Simplex Virus Type 1 infection: overview on relevant clinico-pathological features. J Oral Pathol Med 2008; 37(2): 107-21.
  2. Taylor TJ, Brockman MA, McNamee EE, Knipe DM. Herpes simplex virus. Front Biosci 2002; 7: d752-d764.
  3. Mossman KL, Ashkar AA. Herpesviruses and the innate immune response. Viral Immunol 2005; 18(2): 267-81.
  4. Rabenau HF, Buxbaum S, Preiser W, Weber B, Doerr HW. Seroprevalence of herpes simplex virus types 1 and type 2 in the Frankfurt am Main area, Germany. Med Microbiol Immunol 2002; 190(4): 153-60.
  5. Griffiths PD. Herpesviruses. Medicine 2014; 42(1): 34-8.
  6. Gilden DH, Mahalingam R, Cohrs RJ, Tyler KL. Herpesvirus infections of the nervous system. Nat Clin Pract Neurol 2007; 3(2): 82-94.
  7. Farooq AV, Shukla D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv Ophthalmol 2012; 57(5): 448-62.
  8. Rao S, Abzug MJ, Carosone-Link P, Peterson T, Child J, Siparksy G, et al. Intravenous acyclovir and renal dysfunction in children: a matched case control study. J Pediatr 2015; 166(6): 1462-8.
  9. Lam NN, Weir MA, Yao Z, Blake PG, Beyea MM, Gomes T, et al. Risk of acute kidney injury from oral acyclovir: A population-based study. Am J Kidney Dis 2013; 61(5): 723-9.
  10. Chowdhury MA, Derar N, Hasan S, Hinch B, Ratnam S, Assaly R. Acyclovir-induced neurotoxicity: A case report and review of literature. Am J Ther 2016; 23(3): e941-e943.
  11. Skalsky RL, Cullen BR. Viruses, microRNAs, and host interactions. Annu Rev Microbiol 2010; 64: 123-41.
  12. Swaminathan S, Hu X, Zheng X, Kriga Y, Shetty J, Zhao Y, et al. Interleukin-27 treated human macrophages induce the expression of novel microRNAs which may mediate anti-viral properties. Biochem Biophys Res Commun 2013; 434(2): 228-34.
  13. Martin C, Leyton L, Hott M, Arancibia Y, Spichiger C, McNiven MA, et al. herpes simplex virus type 1 neuronal infection perturbs golgi apparatus integrity through activation of Src tyrosine kinase and Dyn-2 GTPase. Front Cell Infect Microbiol 2017; 7: 371.
  14. Duan F, Ni S, Nie Y, Huang Q, Wu K. Small interfering RNA targeting for infected-cell polypeptide 4 inhibits herpes simplex virus type 1 replication in retinal pigment epithelial cells. Clin Exp Ophthalmol 2012; 40(2): 195-204.
  15. van MJ, Kaspers GJ, Cloos J. Cell sensitivity assays: the MTT assay. Methods Mol Biol 2011; 731: 237-45.
  16. Duan F, Liao J, Huang Q, Nie Y, Wu K. HSV-1 miR-H6 inhibits HSV-1 replication and IL-6 expression in human corneal epithelial cells in vitro. Clin Dev Immunol 2012; 2012: 192791.
  17. Jin HY, Gonzalez-Martin A, Miletic AV, Lai M, Knight S, Sabouri-Ghomi M, et al. Transfection of microRNA mimics should be used with caution. Front Genet 2015; 6: 340.