بررسی اثر محفاظتی ویتامین C بر روی اسپرماتوسیت‌ها در موش‌های صحرایی نر مبتلا به صرع شده با پنتلین تترازول به روش ایمونوهیستوشیمی

نوع مقاله : مقاله های پژوهشی

نویسندگان

1 دانشیار، گروه علوم تشریحی، دانشکده‌ی پزشکی و مر کز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی سبزوار، سبزوار، ایران

2 دانشیار، گروه جراحی، دانشکده‌ی پزشکی و مرکز تحقیقات بیماری‌های غیر واگیر، دانشگاه علوم پزشکی سبزوار، سبزوار، ایران

3 کمیته‌ی تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی سبزوار، سبزوار، ایران

4 دانشجوی پزشکی، کمیته‌ی تحقیقات دانشجویی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی سبزوار، سبزوار، ایران

چکیده

مقدمه: از آن جایی که در مورد تأثیر ویتامین C بر روی اسپرماتوسیت‌های موش‌های مبتلا به صرع، گزارشی مشاهده نشد؛ این مطالعه، با هدف ارزیابی نقش محافظتی ویتامین C بر روی تعداد و ساختار اسپرماتوسیت موش‌های مبتلا به صرع شده با پنتلین تترازول انجام شد.روش‌ها: در این مطالعه، 40 سر موش نر به صورت تصادفی به 5 گروه 8تایی تقسیم شدند. گروه شم (اول) مبتلا به صرع شده با پنتلین تترازول (40 میلی‌گرم/کیلوگرم + سرم فیزیولوژی)، گروه‌های دوم، سوم و چهارم تجربی مبتلا به صرع شده که دزهای 125، 25 و 500 میلی‌گرم/کیلوگرم ویتامین C دریافت کردند. گروه پنجم، گروه شاهد منفی بود که فقط سرم فیزیولوژی داخل صفاقی دریافت کردند. پس از دوره‌ی درمان، بیضه‌ی راست حیوانات، با بیهوشی عمیق خارج و پس از پاساژ بافتی و رنگ‌آمیزی هماتوکسیلین- ائوزین، شمارش اسپرماتوسیت انجام گرفت. تغییرات ریخت‌شناسی نمونه‌ها با استفاده از روش هیستولوژی و ایمونوهیستوشیمی انجام شد. برای بررسی تغییرات معنی‌دار بین نمونه‌های مورد و شاهد، داده‌ها با آزمون ANOVA واکاوی شد.یافته‌ها: میانگین تعداد اسپرماتوسیت موش‌های گروه مبتلا به صرع شده در مقایسه با گروه شاهد کاهش یافت (001/0 > P). افزایش معنی‌داری در میانگین تعداد سلول‌های اسپرماتوسیت موش‌های مبتلا به صرع شده که 250 میلی‌گرم/کیلوگرم ویتامین C می‌گرفتند، در مقایسه با گروهی که 125 میلی‌گرم/کیلوگرم ویتامین C و یا سرم فیزیولوژی دریافت می‌کردند، دیده شد (010/0 > P). تغییرات ریخت‌شناسی بر روی اسپرماتوسیت همچون متراکم شدن هسته و اسیدوفیلی در سیتوپلاسم سلول‌های اسپرماتوسیت در موش‌های مبتلا به صرع شده، نسبت به گروه شاهد بیشتر مشاهده شد.نتیجه‌گیری: نتایج مطالعه‌ی حاضر نشان داد که افزودن ویتامین C، اثرات سمی پنتلین تترازول را بر روی اسپرماتوسیت‌های موش‌های مبتلا به صرع کاهش می‌دهد.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Evaluation of the Protective Effect of Vitamin C on Spermatocytes in Rats with Pentylenetetrazole-Induced Epilepsy Using Immunohistochemistry

نویسندگان [English]

  • Rahim Golmohammadi 1
  • Hamid Reza Baghani-Aval 2
  • Batool Kamalimanesh 3
  • Sajad Afraciabi 4
1 Associate Professor, Department of Anatomy, School of Medicine AND Cellular and Molecular Research Center, Sabzevar University of Medical Sciences, Sabzvar, Iran
2 Associate Professor, Department of Surgery, School of Medicine AND Non-Communicable Diseases Research Center, Sabzevar University of Medical Sciences, Sabzvar, Iran
3 Student Research Committee, Sabzevar University of Medical Sciences, Sabzvar, Iran
4 Student of Medicine, Student Research Committee, School of Medicine, Sabzevar University of Medical Sciences, Sabzevar, Iran
چکیده [English]

Background: There has not been yet reports regarding the protective effect of vitamin C on spermatocytes in epileptic rats. The present study aimed to evaluate the protective role of vitamin C on numbers and structure spermatocytes in rats with pentylentetrazol-induced epilepsy.Methods: Forty male rats were randomly divided into five groups of 8, and were kindled with pentylentetrazol (40 mg/kg). The first group (sham) received normal saline. The second, third, and forth experimental groups treated with 125, 250, and 500 mg/kg of vitamin C, respectively. The negative control group was given only normal saline via intraperitoneal injection. All rats were then deep anesthetized and sacrificed, and their right testis were dissected. Histological sections were prepared, and stained with hematoxylin-eosin (H/E). The number of spermatocytes in sections were counted, and morphological changes were studied using histology and immunohistochemical methods. Data were analyzes using ANOVA test to determine significant differences between cases and controls.Findings: There was a significant decrease in spermatocytes numbers in epileptic rats compared with intact control group (P < 0.001). The spermatocytes significantly increased in rats, which received 250 mg/kg vitamin C compared to those received 125 mg/kg vitamin C or normal saline (P < 0.010). The morphological changes such as dense nuclei and more acidophilic cytoplasm were observed in epileptic rats compared to control groups.Conclusion: The present study showed that vitamin C supplementation would protect spermatocytes by decreasing the neurotoxin effects of pentylentetrazol in epileptic rats.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Rats
  • Vitamin C
  • Epilepsy
  • Spermatocytes

مراجع

  1. Fiest KM, Sauro KM, Wiebe S, Patten SB, Kwon CS, Dykeman J, et al. Prevalence and incidence of epilepsy: A systematic review and meta-analysis of international studies. Neurology 2017; 88(3): 296-303.
  2. Shimada T, Yamagata K. Pentylenetetrazole-Induced Kindling Mouse Model. J Vis Exp 2018; (136): 56573.
  3. Hsine Z, Bizid S, Milka R, Sauriat-Dorizon H, Haj SA, Korri-Youssoufi H. Nanocomposite based on Poly (para-phenylene)/Chemical Reduced Graphene Oxide as a Platform for Simultaneous Detection of Ascorbic Acid, Dopamine and Uric Acid. Sensors (Basel) 2020; 20(5): 1256.
  4. Zare S, Hossein DM, Noorafshan A, Koohpeyma F, Bakhshayeshkaram M, Montazeri-Najafabady N. Protective effect of vitamin E and vitamin C alone and in combination on testicular damage induced by sodium metabisulphite in rats: A stereological study. Andrologia 2019; 51(2): e13193.
  5. Ghasemi N, Dashti G, Amoozgar F, Vaez SA. Effect of cholesterol, iron and vitamin E on protamine deficiency and dna fragmentation of male rabbit sperm. J Isfahan Med Sch 2013; 31(259): 1769-78. [In Persian].
  6. Gown AM, Willingham MC. Improved detection of apoptotic cells in archival paraffin sections: immunohistochemistry using antibodies to cleaved caspase 3. J Histochem Cytochem 2002; 50(4): 449-54.
  7. Shabanian S, Farahbod F, Rafieian M, Ganji F, Adib A. The effects of vitamin C on sperm quality parameters in laboratory rats following long-term exposure to cyclophosphamide. J Adv Pharm Technol Res 2017; 8(2): 73-9.
  8. Li Y, Xue Y, Bao B, Wang J, Dai H, Gong X, et al. Effectiveness comparison of a Chinese dicitraditionalmene formula Wuzi Yanzong Pill and its analogous prescriptions for the treatment of oligoasthenozoospermia: A systematic review and meta-analysis protocol. Medicine (Baltimore) 2019; 98(20): e15594.
  9. Santos LF, Freitas RL, Xavier SM, Saldanha GB, Freitas RM. Neuroprotective actions of vitamin C related to decreased lipid peroxidation and increased catalase activity in adult rats after pilocarpine-induced seizures. Pharmacol Biochem Behav 2008; 89(1): 1-5.
  10. Azari O, Gholipour H, Kheirandish R, Babaei H, Emadi L. Study of the protective effect of vitamin C on testicular tissue following experimental unilateral cryptorchidism in rats. Andrologia 2014; 46(5): 495-503.
  11. Buhling KJ, Laakmann E. The effect of micronutrient supplements on male fertility. Curr Opin Obstet Gynecol 2014; 26(3): 199-209.
  12. Wang L, Li P, Wen Y, Yang Q, Zhen L, Fu J, et al. Vitamin C exerts novel protective effects against cadmium toxicity in mouse spermatozoa by inducing the dephosphorylation of dihydrolipoamide dehydrogenase. Reprod Toxicol 2018; 75: 23-32.
  13. Toghiani S, Hayati RN, Dashti GR, Rouzbehani S. The effects of vitamin C and menthone on acyclovir induced DNA damage in rat spermatozoa: An experimental study. Int J Reprod Biomed 2018; 16(11): 703-10.
  14. Manjula KR, Subramanyam MV, Asha DS. Protection against oxidative stress caused by intermittent cold exposure by combined supplementation with vitamin E and C in the aging rat hypothalamus. Neurochem Res 2013; 38(4): 876-85.
  15. Jahan S, Azad T, Ayub A, Ullah A, Afsar T, Almajwal A, et al. Ameliorating potency of Chenopodium album Linn. and vitamin C against mercuric chloride-induced oxidative stress in testes of Sprague Dawley rats. Environ Health Prev Med 2019; 24(1): 62.
  16. Rizk NI, Rizk MS, Mohamed AS, Naguib YM. Attenuation of sleep deprivation dependent deterioration in male fertility parameters by vitamin C. Reprod Biol Endocrinol 2020; 18(1): 2.
مجله دانشکده پزشکی اصفهان
دوره 38، شماره 588 - شماره پیاپی 588
مهر و آبان 1399
صفحه 615-620

فایل ها

سابقه مقاله

  • تاریخ دریافت: 31 فروردین 1399
  • تاریخ بازنگری: 11 آبان 1403
  • تاریخ پذیرش: 17 فروردین 1401

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار