نقش آپوپتوزیس در جدا شدن شیار پلک نوزاد رت با روش هماتوکسیلین– ائوزین

نوع مقاله : Original Article(s)

نویسندگان

1 استادیار، گروه علوم تشریحی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

2 استاد، گروه علوم تشریحی و مرکز تحقیقات کاربردی دارویی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز، تبریز، ایران

چکیده

مقدمه: آپوپتوز یا مرگ برنامه‏ریزى شده‌ی سلول فرایندى است که طى آن سلول‌هاى ناخواسته به دنبال فعالیت هماهنگ و برنامه‏ریزى شده‌ی مجموعه‌ی دقیقى از ژن‌ها از بین مى‏روند. آپوپتوز در تکامل رویان، پاتوژنز سرطان و پاسخ‌هاى ایمنى هومورال نیز مورد توجه است. با توجه به نقش آپوپتوز در تکامل جنین در این مطالعه نقش آن در جدا شدن پلک‌هاى رت نوزاد مورد بررسى قرار گرفت. روش‌ها: آپوپتوز یا مرگ برنامه‏ریزى شده‌ی سلول فرایندى است که طى آن سلول‌هاى ناخواسته به دنبال فعالیت هماهنگ و برنامه‏ریزى شده‌ی مجموعه‌ی دقیقى از ژن‌ها از بین مى‏روند. آپوپتوز در تکامل رویان، پاتوژنز سرطان و پاسخ‌هاى ایمنى هومورال نیز مورد توجه است. با توجه به نقش آپوپتوز در تکامل جنین در این مطالعه نقش آن در جدا شدن پلک‌هاى رت نوزاد مورد بررسى قرار گرفت. یافته‌ها: بررسى میکروسکوپیک محل باز شدن پلک‏‌ها نشان داد که پیدایش شیار پلکى به صورت فرورفتگى از سطح خارجى و داخلى شروع و پس از به هم رسیدن این فرورفتگى‏‌ها، پلک‏‌ها از هم جدا مى‏گردند. تغییراتى که ضمن پیشرفت فرورفتگى‏‌ها ملاحظه مى‏گردند عبارتند از ظهور سلول‌هاى وزیکوله با مشخصات مورفولوژیک سلول‌هاى آپوپتوتیک شامل پیکنوز هسته، چروکیدگى سلول، ائوزینوفیلى سیتوپلاسم و پیدایش حلقه‌ی روشن و خالى در اطراف سلول‌ها. این سلول‌ها به تعداد فراوان و به صورت گروهى از روز ششم تا دوازدهم در عمل پیدایش شیار و از روز دوازدهم به بعد به صورت پراکنده در بین سلول‌هاى خاردار طبقه‌ی اپی‌درم پلک‌هاى در حال تشکیل مشاهده شدند. تغییر دیگرى که ضمن پیدایش شیار پلکى ملاحظه مى‏گردد، گسترش اپی‌درم شاخى سطح خارجى و سنگفرشى مطبق غیرشاخى سطح داخلى پلک در محل فرورفتگى‏‌ها است که با پیدایش لایه‏‌هاى مختلف اپی‌درم شامل طبقات بازال، خاردار، گرانولر و شاخى همراه مى‏باشد. نتیجه‌گیری: نقش آپوپتوز در پدیده‌ی تکامل چه قبل از Implantation و چه بعد از آن و نیز در تنظیم جمعیت سلولى ارگان‌هاى افراد بالغ مشخص شده است. مشاهده‌ی سلول‌هایى با مشخصات مورفولوژیک سلول‌هاى آپوپتوتیک در محل جدا شدن پلک چشم نوزادان رت بیان‌گر نقش آپوپتوز در پیدایش شیار پلک چشم نوزادان رت مى‏باشد. با توجه به سهولت دستیابى به سلول‌هاى آپوپتوتیک در محل پیدایش شیار پلکى، محل جدا شدن پلک چشم رت مى‏تواند به عنوان مدل بسیار مناسبى براى بررسى مهار کننده‏‌ها و القاء کننده‏‌هاى آپوپتوز مورد استفاده قرار گیرد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Role of Apoptosis in Separation of Eyelid in Newborn Rat with Method of Hemathoxylin and Eosin

نویسندگان [English]

  • Bahman Rashidi 1
  • Jafar Soleimani Rad 2
1 Assistant Professor, Department of Anatomy and Histology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran.
2 Professor, Department of Anatomy and Histology, School of Medicine, Tabriz University of Medical Sciences, Tabriz, Iran.
چکیده [English]

Background: Apoptosis or programmed cell death is a process in which the unwanted cells die after a coordinated and planned activities of an accurate collection of genes. Apoptosis are considered in embryo development, cancer pathogenesis and humoral immune responses. Considering the role of apoptosis in fetal development, this study was done to investigate its role in separating eyelids in neonatal rats. Methods: For this purpose the unopened eyelids of 6-16 days old Wister newborn rats were removed after anesthesia and fixed in 10% formolin. After preparation and paraffin embedding, 5 micron thick sections stained with hemathoxylin and eosin, and studied with light microscope. Finding: Microscopic assessment of opening place of eyelids showed that the eyelid groove formation starts with external and internal surface troughs. After reaching the troughs together, the eyelids are separated.The main changes that occurred during eyelid formation are appearance of vesicular cells with morphologic characteristics of apoptotic cells includes: nuclear pyknosis, cell shrinkage, deeply eosinophilic cytoplasm surrounded by, and clear halo. These cells were abundant form 6th to 16th day. After 12th day these cells were seen among the cells of spinosum layer. The other change that we could see during eyelid formation was development of keratinized epidermis of external surface and nonkeratinized stratified squamous epithelium of the internal surface of eyelid. Conclusion: Role of apoptosis in developing embryo, before and after implantation, is well known. Presence of cells with characteristics of apoptotic cells in the site of eyelid development in rat Showed the role of apoptosis in eyelid formation. Easy to access of apoptotic cells in eyelid formation in newborn rats can serve rat as a very suitable model for evaluating the inhibitors and inductors of apoptosis.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Pyknosis
  • Apoptotic cell
  • Apoptosis
  • Eyelid
  1. Cotran RS, Kumar V, Colliens T. Robbins Patho-logic Basis of Disease. 6th ed. Philadelphia: Saunders; 1999. p. 18-25, 289-92.
  2. Jonathan CF, Vickas V, Patel. Apoptosis and the Cardiovascular System. ACC Current J Review 1998; 13-5.
  3. Kerr JF, Harmon B, Searle J. An electron-microscope study of cell deletion in the anuran tadpole tail during spontaneous metamorphosis with special reference to apoptosis of striated muscle fibers. J Cell Sci 1974; 14(3): 571-85.
  4. Hardy K. Apoptosis in the human embryo. Rev Reprod 1999; 4(3): 125-34.
  5. Nishikori T, Hatta T, Kawauchi H, Otani H. Apoptosis during inner ear development in hu-man and mouse embryos: an analysis by com-puter-assisted three-dimensional reconstruction. Anat Embryol (Berl) 1999; 200(1): 19-26.
  6. Reyes FA, Chavarria Olarte ME. [The participa-tion of apoptosis in the development and func-tion of the male gonad]. Ginecol Obstet Mex 1999; 67: 330-40.
  7. Rice DP, Kim HJ, Thesleff I. Apoptosis in murine calvarial bone and suture development. Eur J Oral Sci 1999; 107(4): 265-75.
  8. Hewitson TD, Darby IA. In situ localization of apoptosis using TUNEL. Methods Mol Biol 2010; 611: 161-70
  9. Studzinski GP. Apoptosis: A Practical Approach. Oxford: Oxford University Press; 1999. P.1-39.
  10. Abdelwahid E, Pelliniemi LJ, Niinikoski H, Simell O, Tuominen J, Rahkonen O, et al. Apoptosis in the pattern formation of the ventricular wall dur-ing mouse heart organogenesis. Anat Rec 1999; 256(2): 208-17.
  11. Georges P, Madigan MC, Provis JM. Apoptosis during development of the human retina: rela-tionship to foveal development and retinal syn-aptogenesis. J Comp Neurol 1999; 413(2): 198-208.
  12. Ciccocioppo R, Di Sabatino A, Gasbarrini G, Corazza GR. Apoptosis and gastrointestinal tract. Ital J Gastroenterol Hepatol 1999; 31(2): 162-72.
  13. Aihara M, Scardino PT, Truong LD, Wheeler TM, Goad JR, Yang G, et al. The frequency of apoptosis correlates with the prognosis of Gleason Grade 3 adenocarcinoma of the pros-tate. Cancer 1995; 75(2): 522-9.
  14. Staunton MJ, Gaffney EF. Tumor type is a de-terminant of susceptibility to apoptosis. Am J Clin Pathol 1995; 103(3): 300-7.
  15. Aihara M, Truong LD, Dunn JK, Wheeler TM, Scardino PT, Thompson TC. Frequency of apop-totic bodies positively correlates with Gleason grade in prostate cancer. Hum Pathol 1994; 25(8): 797-801.
  16. Taylor JK, Zhang QQ, Monia BP, Marcusson EG, Dean NM. Inhibition of Bcl-xL expression sensitizes normal human keratinocytes and epi-thelial cells to apoptotic stimuli. Oncogene 1999; 18(31): 4495-504.
  17. Li G, Bush JA, Ho VC. Effect of retinoic acid on apoptosis and DNA repair in human keratino-cytes after UVB irradiation. J Cutan Med Surg 2000; 4(1): 2-7.
  18. Nishizaki K, Anniko M, Orita Y, Masuda Y, Yoshino T, Kanda S, et al. Programmed cell death in the development of the mouse external auditory canal. Anat Rec 1998; 252(3): 378-82.
  19. Magerl M, Tobin DJ, Muller-Rover S, Hagen E, Lindner G, McKay IA, et al. Patterns of prolifer-ation and apoptosis during murine hair follicle morphogenesis. J Invest Dermatol 2001; 116(6): 947-55.
  20. Ouhtit A, Gorny A, Muller HK, Hill LL, Owen-Schaub L, Ananthaswamy HN. Loss of Fas-ligand expression in mouse keratinocytes during UV carcinogenesis. Am J Pathol 2000; 157(6): 1975-81.
  21. Nguyen VT, Ndoye A, Hall LL, Zia S, Arredondo J, Chernyavsky AI, et al. Programmed cell death of keratinocytes culminates in apoptotic secre-tion of a humectant upon secretagogue action of acetylcholine. J Cell Sci 2001; 114(Pt 6): 1189-204.
  22. Chaturvedi V, Qin JZ, Denning MF, Choubey D, Diaz MO, Nickoloff BJ. Apoptosis in proliferat-ing, senescent, and immortalized keratinocytes. J Biol Chem 1999; 274(33): 23358-67.
  23. Breuhahn K, Mann A, Muller G, Wilhelmi A, Schirmacher P, Enk A, et al. Epidermal overex-pression of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor induces both keratinocyte pro-liferation and apoptosis. Cell Growth Differ 2000; 11(2): 111-21.
  24. Smith SC, Baker PN, Symonds EM. Increased placental apoptosis in intrauterine growth re-striction. Am J Obstet Gynecol 1997; 177(6):
  25. -401.
  26. Smith SC, Baker PN, Symonds EM. Increased placental apoptosis in intrauterine growth re-striction. Am J Obstet Gynecol 1997; 177(1): 57-65.
  27. Lin WW, Lamb DJ, Wheeler TM, Abrams J, Lip-shultz LI, Kim ED. Apoptotic frequency is in-creased in spermatogenic maturation arrest and hypospermatogenic states. J Urol 1997; 158(5): 1791-3.
  28. Kim HA, Song YW. Apoptotic chondrocyte death in rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum 1999; 42(7): 1528-37.
  29. Kim HA, Lee YJ, Seong SC, Choe KW, Song YW. Apoptotic chondrocyte death in human os-teoarthritis. J Rheumatol 2000; 27(2): 455-62.
  30. Fujikawa DG, Shinmei SS, Cai B. Seizure-induced neuronal necrosis: implications for pro-grammed cell death mechanisms. Epilepsia 2000; 41 Suppl 6: S9-13.
  31. Hotchkiss RS, Swanson PE, Freeman BD, Tins-ley KW, Cobb JP, Matuschak GM, et al. Apop-totic cell death in patients with sepsis, shock, and multiple organ dysfunction. Crit Care Med 1999; 27(7): 1230-51.
  32. Kashihara K. Detection of apoptosis using he-matoxylin-eosin. Arch Pathol Lab Med 1998; 122(6): 493.
  33. Mohamed YH, Gong H, Amemiya T. Role of apoptosis in eyelid development. Exp Eye Res 2003; 76(1): 115-23.