بررسی اثرات دزهای بالای عصاره‌ی هیدروالکلی سیاه‌دانه بر روی حرکت و آپوپتوز اسپرم در مردان نورموزواسپرم

نوع مقاله : مقاله های پژوهشی

نویسندگان

1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه علوم تشریح، دانشکده‌ی پزشکی و کمیته‌ی تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

2 دانشیار، گروه علوم تشریح، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

3 دانشیار، گروه فارموکوگنوزی، دانشکده‌ی داروسازی وعلوم دارویی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

4 آزمایشگاه آندرولوژی، بیمارستان شهید بهشتی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

5 استادیار، گروه علوم تشریح، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

چکیده

مقدمه: مطالعات گذشته، حاکی از آن هستند که دزهای بالای تیموکینون، قادر به متوقف نمودن حرکت اسپرم‌ها در محیط کشت است. هدف از این مطالعه بررسی تأثیر عصاره‌ی سیاه‌دانه و تیموکینون بر روی حرکت و آپوپتوز اسپرم در مردان نورموزواسپرم بود.روش‌ها: برای هر کدام از غلظت‌های سیاه‌دانه )5 و 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر) 10 نمونه‌ی شسته شده‌ی مایع منی مورد استفاده قرار گرفت. دو حجم 5/0 میلی‌لیتری از هر نمونه با یا بدون دز مورد نظر به عنوان نمونه‌ی مورد و شاهد انکوبه شدند. حرکت کلی اسپرم‌ها، بعد از یک ساعت تعیین گردید. به علاوه، آپوپتوز اسپرم‌ها به دنبال دریافت دز 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر با روش رنگ‌آمیزی Annexin-Propidium iodide و به دنبال آن بررسی با روش فلوسایتومتری انجام پذیرفت.یافته‌ها: هر دو دز عصاره‌ی سیاه‌دانه، به طور قابل توجهی سبب کاهش درصد کل حرکت، درصد اسپرم‌‌ها با حرکت پیش‌رونده‌ی سریع و کند و حرکت غیر پیش‌رونده می‌گردند. بعد از استفاده از عصاره‌ی سیاه‌دانه، درصد اسپرم‌های زنده، آپوپتوتیک و نکروتیک تغییر قابل ملاحظه‌ای نشان ندادند.نتیجه‌گیری: دزهای 5 و 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر عصاره‌ی سیاه‌دانه، به طور قابل ملاحظه‌ای درصد اسپرم‌های متحرک را در محیط کشت کاهش می‌دهند. به همین ترتیب، عصاره‌ی سیاه‌دانه با دز 10 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر، درصد اسپرم‌های زنده را در محیط کشت تغییر نمی‌دهد.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

Effects of High Doses of Hydroalcoholic Extract of Nigella Sativa on Sperm Motility and Apoptosis in Normozoospermic Men

نویسندگان [English]

  • Nahid Sadeghnejad 1
  • Gholam Reza Dashti 2
  • Behzad Zolfaghari 3
  • Shekofeh Baghazadeh 4
  • Farhad Golshan-Iranpour 5
1 MSc Student, Department of Anatomical Sciences, School of Medicine AND Student Research Committee, Isfahan University Medical Sciences, Isfahan, Iran
2 Associate Professor, Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Isfahan University Medical Sciences, Isfahan, Iran
3 Associate Professor, Department of Pharmacognosy Sciences, School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Isfahan University Medical Sciences, Isfahan, Iran
4 Andrology Laboratory, Shahid Beheshti Hospital, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
5 Assistant Professor, Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Isfahan University Medical Sciences, Isfahan, Iran
چکیده [English]

Background: Previous studies have revealed that high doses of Thymoquinone (TQ) is able to cease the movement of sperms in culture medium.The aim of this study was to investigate and evaluate whether Nigella sativa (NS) extract has similar effect on spermatozoa with TQ or not.Methods: Ten washed semen samples were used for each concentration of NS (5 and 10 mg/ml). Two 0.5 mlaliquots of each sample were incubated with or without the considered dose as case and control samples. Total sperm motility was assessed after one hour. In addition, apoptosis of sperms receiving dose of 10 mg/ml were measured by Annexin-PI staining method followed by flow cytometry detection.Findings: Both doses of NS extract substantially reduce the percentage of total motility, fast and slow progressive and non-progressive sperms. After administration of NS extract, the percentages of alive, apoptotic and necrotic sperms did not show significant change.Conclusion: 5 and 10 mg/ml doses of NS extract considerably diminish the percentage of motile spermatozoa in culture medium. Similarly, NS extract with dose of 10 mg/ml does not change the percentage of viable spermatozoa in culture medium.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Apoptosis
  • Nigella sativa
  • Sperm motility

مراجع

  1. Kadkhodaei Elyaderani M, Saki G, Saki J. Study the effect of oxamate on rat sperm motility in vivo. Jundishapur Sci Med J 2009; 8(2): 169-76. [In Persian].
  2. Ball BA, Medina V, Gravance CG, Baumbe J. Effect of antioxidants on preservation of motility,viability and acrosomal integrity of equine spermatozoa during storage at 5 degrees C. Theriogenology 2001; 56(4): 577-89.
  3. Hughes LM, Griffith R, Carey A, Butler T, Donne SW, Beagley KW, et al. The spermostatic and microbicidal actions of quinones and maleimides: toward a dual-purpose contraceptive agent. Mol Pharmacol 2009; 76(1): 113-24.
  4. Hughes LM, Griffith R, Aitken RJ. The search for a topical dual action spermicide/microbicide. Curr Med Chem 2007; 14(7): 775-86.
  5. Turner RM. Moving to the beat: a review of mammalian sperm motility regulation. Reprod Fertil Dev 2006; 18(1-2): 25-38.
  6. Tash JS, Means AR. Cyclic adenosine 3',5' monophosphate, calcium and protein phosphorylation in flagellar motility. Biol Reprod 1983; 28(1): 75-104.
  7. Niazmand S, Fereidouni E, Mahmoudabady M, Mousavi SM. Endothelium-independent vasorelaxant effects of hydroalcoholic extract from Nigella sativa seed in rat aorta: the roles of Ca2+ and K+ channels. Biomed Res Int 2014; 2014: 247054.
  8. Chaieb K, Kouidhi B, Jrah H, Mahdouani K, Bakhrouf A. Antibacterial activity of Thymoquinone, an active principle of Nigella sativa and its potency to prevent bacterial biofilm formation. BMC Complement Altern Med 2011; 11: 29.
  9. Alhimaidi AB. Thymoqunone treatment of intracytoplasmic sperm injection (ICSI) compared to in vitro fertilization (IVF) of mice oocytes and their development in vitro. Adv Mol Med 2005; 1(3): 119-23.
  10. Kamarzaman S, Abdul Wahab AY, Abdul Rahman S. Effects of thymoquinone supplementation on cyclophosphamide toxicity of mouse embryo in vitro. Glob Vet 2014; 12(1): 80-90.
  11. Fazelian K, Dashti G, Golshan Iranpour F, Baghazadeh S. Effects of low doses of exogenous thymoquinone on sperm motility and viability of normozoospermic men. J Isfahan Med Sch 2014; 32(287): 776-83. [In Persian].
  12. World Health Organization, Department ofReproductive Health and Research. WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen. Geneva, Switzerland: WHO; 2010.
  13. Kime DE, Ebrahimi M, Nysten K, Roelants I, Rurangwa E, Moore HDM, et al. Use of computer assisted sperm analysis (CASA) for monitoring the effects of pollution on sperm quality of fish; application to the effects of heavy metals. Aquatic Toxicology 1996; 36(3): 223-37.
  14. Ricci G, Perticarari S, Fragonas E, Giolo E, Canova S, Pozzobon C, et al. Apoptosis in human sperm: its correlation with semen quality and the presence of leukocytes. Hum Reprod 2002; 17(10): 2665-72.
  15. AL-Zuhairy RGM. The phytotherapeutic effect of traditional crude oil of Nigella sativa on male reproductive system of albino mice treated with low toxic dose of paracetamol. Med J Babylon 2012; 9(1): 229-37.
  16. Bashandy AS. Effect of fixed oil of Nigella sativa on male fertility in normal and hyperlipidemic rats. Int J Pharmacol 2007; 3(1): 27-33.
  17. Aboul-Ela EI. Cytogenetic studies on Nigella sativa seeds extract and thymoquinone on mouse cells infected with schistosomiasis using karyotyping. Mutat Res 2002; 516(1-2): 11-7.
  18. Al-Sa'aidi JAA, Al-Khuzai ALD, Al-Zobaydi NFH. Effect of alcoholic extract of Nigella sativa on fertility in male rats. Iraqi J Vet Sci 2009; 23(Suppl 2): 123-8.
  19. El Khasmi M, Issaoub Allah A, Farh M, Riad F, Safwate A, El Abbadi N, et al. Effect of Nigella sativa fixed oil on the hormonal profile of androgens and circulating in male rats. Phytotherapie 2011; 9(6): 338-42.
  20. Centola GM. Dose-response effects of gramicidin-D, EDTA, and nonoxynol-9 on sperm motion parameters and acrosome status. Contraception 1998; 58(1): 35-8.
  21. Malkovsky M, Newell A, Dalgleish AG. Inactivation of HIV by nonoxynol-9. Lancet 1988; 1(8586): 645.
  22. Roddy RE, Cordero M, Cordero C, Fortney JA. A dosing study of nonoxynol-9 and genital irritation. Int J STD AIDS 1993; 4(3): 165-70.
  23. Ford WC. Glycolysis and sperm motility: does a spoonful of sugar help the flagellum go round? Hum Reprod Update 2006; 12(3): 269-74.
  24. Hess KC, Jones BH, Marquez B, Chen Y, Ord TS, Kamenetsky M, et al. The "soluble" adenylyl cyclase in sperm mediates multiple signaling events required for fertilization. Dev Cell 2005; 9(2): 249-59.
  25. Bajpai M, Doncel GF. Involvement of tyrosine kinase and cAMP-dependent kinase cross-talk in the regulation of human sperm motility. Reproduction 2003; 126(2): 183-95.
  26. Miki K, Willis WD, Brown PR, Goulding EH, Fulcher KD, Eddy EM. Targeted disruption of the Akap4 gene causes defects in sperm flagellum and motility. Dev Biol 2002; 248(2): 331-42.
  27. Tash JS, Means AR. Regulation of protein phosphorylation and motility of sperm by cyclic adenosine monophosphate and calcium. Biol Reprod 1982; 26(4): 745-63.
  28. Hamasaki T, Barkalow K, Richmond J, Satir P. cAMP-stimulated phosphorylation of an axonemal polypeptide that copurifies with the 22S dynein arm regulates microtubule translocation velocity and swimming speed in Paramecium. Proc Natl Acad Sci U S A 1991; 88(18): 7918-22.
مجله دانشکده پزشکی اصفهان
دوره 34، شماره 381 - شماره پیاپی 381
خرداد و تیر 1395
صفحه 470-477

فایل ها

سابقه مقاله

  • تاریخ دریافت: 26 دی 1394
  • تاریخ بازنگری: 06 اردیبهشت 1403
  • تاریخ پذیرش: 17 فروردین 1401

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار