بررسی واکنش آنتی‌سرم‌های ضد آنتی‌ژن‌های کیست هیداتیک با آنتی‌ژن‌های سطحی رده‌های سلولی سرطان پستان (4T1)، ملانوما (B16F10) و سلول‌های طبیعی طحال موش به روش فلوسیتومتری

نوع مقاله : مقاله های پژوهشی

نویسندگان

1 دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه انگل‌شناسی و قارچ‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

2 دکتری تخصصی، مرکز تحقیقات محیط زیست، پژوهشکده‌ی پیشگیری اولیه از بیماری‌های غیر واگیر، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

3 استاد، گروه ایمنی‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

4 دکتری تخصصی، گروه انگل‌شناسی و قارچ‌شناسی، دانشکده‌ی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

5 استاد، مرکز تحقیقات پیش‌گیری از سرطان، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران

چکیده

مقدمه: کیست هیداتیک، مرحله‌ی لاروی کرم Echinococcus granulosus است. اثر این انگل روی رشد سرطان در محیط کشت و در مطالعات حیوانی مختلف بررسی شده است. در جهت مطالعه‌ی مکانیسم‌‌های ضد سرطانی این انگل، در مطالعه‌ی حاضر، واکنش آنتی‌سرم‌های ضد آنتی‌ژن‌های کیست هیداتیک با آنتی‌ژن‌های سطح سلول‌های سرطانی ملانوما و پستان موش و سلول‌های طحال موش سالم به روش فلوسیتومتری مورد بررسی قرار گرفت.روش‌ها: آنتی‌سرم‌های ضد آنتی‌ژن‌های کیست هیداتیک در خرگوش تهیه شد. این آنتی‌سرم‌ها، با رده‌های سلولی ملانوما، پستان و سلول‌های طحال موش طبیعی مجاورت داده شد و واکنش آنتی‌بادی‌ها با آنتی‌ژن‌های سطحی این سلول‌ها به روش فلوسیتومتری بررسی گردید.یافته‌ها: میزان واکنش آنتی‌سرم ضد کیست هیداتیک (Protoscolex، دیواره و مایع کیست) با رده‌ی سلول‌های سرطانی ملانوما تفاوت معنی‌داری نداشت، اما میزان واکنش آنتی‌سرم‌های ضد دیواره و مایع کیست با رده‌ی سلول‌های سرطانی پستان اختلاف معنی‌داری داشت. علاوه بر این، میزان واکنش آنتی‌سرم‌های ضد Protoscolex، دیواره و مایع کیست با سلول‌های طحال موش کمتر از میزان واکنش سرم خرگوش طبیعی بود.نتیجه‌گیری: آنتی‌سرم ضد کیست هیداتیک با رده‌ی سلول‌های سرطانی ملانوما واکنش نمی‌دهد، اما با رده‌ی سلول‌های سرطانی پستان واکنش می‌دهد. این نتایج، تأیید کننده‌ی مکانیسم‌های ضد سرطان پستان این انگل می‌باشد. بنابراین، ممکن است بتوان از آن برای دارورسانی انتخابی استفاده کرد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Investigating the Reaction of Antisera against Hydatid Cyst Antigens with the Surface of Breast Cancer (4T1), Melanoma (B16F10), and Normal Spleen Cells Using Flow Cytometry Technique

نویسندگان [English]

  • Fereshteh Mohamadi 1
  • Mahshid Shakibapour 1
  • Seyedeh Maryam Sharafi 2
  • Ali Reza Andalib 3
  • Sepideh Tolouei 4
  • Hossein Yousofi-Darani 5
1 MSc Student, Department of Medical Parasitology and Mycology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
2 PhD, Environment Research Center, Research Institute for Primordial Prevention of Non-Communicable Disease, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
3 Professor, Department of Immunology, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
4 PhD, Department of Medical Parasitology and Mycology, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
5 Professor, Cancer Prevention Research Centre, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
چکیده [English]

Background: Hydatid cyst is the larval stage of the Echinococcus granulosus worm which is located in the humans and animals viscera. In order to study the anticancer mechanisms of this parasite, in this study the response of antisera against hydatid cyst antigens with tumor cells antigens was investigated using flow cytometry technique.Methods: Antisera against hydatid cyst antigens were prepared in rabbits, and added to the melanoma (B16F10) and breast cancer cell (4T1) lines, and also normal mouse spleen cells. The reaction was then monitored via flow cytometry.Findings: There was no significant difference in the reaction of hydatid cyst antisera (protoscolex, cell wall, and cystic fluid) with the melanoma cell line. However, the reaction of antisera against cyst fluid and cyst wall with breast cancer cells was significantly different. Additionally, the reaction of the antisera against protoscolex, wall, and cyst fluid with mouse spleen cells was less than that of normal rabbit serum (as a negative control).Conclusion: The results show that antisera against cyst wall and fluid react with the breast cancer cell line, but not with melanoma cells. These results confirm the anticancer mechanisms of this parasite. So, it may be possible to use it for selective drug delivery.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Flow cytometry
  • Malignant melanoma
  • Breast Cancer
  • Hydatid cyst
  1. Bogitsh BJ, Carter CE, Oeltmann TN. Human parasitology. Cambridge, MA: Academic Press; 2013.
  2. Baldus SE, Engelmann K, Hanisch FG. MUC1 and the MUCs: A family of human mucins with impact in cancer biology. Crit Rev Clin Lab Sci 2004; 41(2): 189-231.
  3. Nyame K, Cummings RD, Damian RT. Schistosoma mansoni synthesizes glycoproteins containing terminal O-linked N-acetylglucosamine residues. J Biol Chem 1987; 262(17): 7990-5.
  4. Alvarez ED, Medeiros A, Miguez M, Casaravilla C, Malgor R, Carmona C, et al. O-glycosylation in Echinococcus granulosus: Identification and characterization of the carcinoma-associated Tn antigen. Exp Parasitol 2001; 98(2): 100-9.
  5. Daneshpour S, Bahadoran M, Hejazi SH, Eskandarian AA, Mahmoudzadeh M, Darani HY. Common antigens between hydatid cyst and cancers. Adv Biomed Res 2016; 5: 9.
  6. Yousofi DH, Soozangar N, Khorami S, Taji F, Yousofi M, Shirzad H. Hydatid Cyst Protoscolices induce cell death in WEHI-164 fibrosarcoma cells and inhibit the proliferation of baby hamster kidney fibroblasts in vitro. J Parasitol Res 2012; 2012: 304183.
  7. Badri-Chookami M, Sharafi SM, Rafeie R, Bahadoran M, Pestechian N, Yousofi-Darani H. Effect of Alive protoscoleces of hydatid cyst on the growth of melanoma cells in mouse model. J Isfahan Med Sch 2014; 32(281): 486-92. [In Persian].
  8. Chookami MB, Sharafi SM, Sefiddashti RR, Jafari R, Bahadoran M, Pestechian N, et al. Effect of two hydatid cyst antigens on the growth of melanoma cancer in C57/black mice. J Parasit Dis 2016; 40(4): 1170-3.
  9. Ramazninia ST, Sharafi SM, Bahadoran M, Jafaee Nodeh F, Mahmoudzadeh M, Yousofi Darani H. Effect of passive transfer of spleen cells from immunized mice with hydatid cyst antigens on the growth of melanoma cancer in C57/Black mice. Br J Med Med Res 2016; 16(7): 1-6.
  10. Yousofi Darani H, Sharafi SM, Mokarian F, Yousefi M, Sharafi S, Jafari R. Therapeutic effect of hydatid cyst liquid on melanoma tumor growth in mouse model. Br J Med Med Res 2016; 18(2): 1-7.
  11. Khudaiberdyev RI, Kamilov K. Morphofunctional characteristics of the blood vessels of the insular apparatus of the pancreas following resection of the stomach (experimental study). Probl Endokrinol (Mosk) 1973; 19(5): 105-9. [In Russian].
  12. Ubillos L, Medeiros A, Cancela M, Casaravilla C, Saldana J, Dominguez L, et al. Characterization of the carcinoma-associated Tk antigen in helminth parasites. Exp Parasitol 2007; 116(2): 129-36.
  13. Thors C, Jansson B, Helin H, Linder E. Thomsen-Friedenreich oncofetal antigen in Schistosoma mansoni : Localization and immunogenicity in experimental mouse infection. Parasitology 2006; 132(Pt 1): 73-81.
  14. Darani HY, Yousefi M. Parasites and cancers: parasite antigens as possible targets for cancer immunotherapy. Future Oncol 2012; 8(12): 1529-35.
  15. Shirzad H, Khorami S, Soozangar N, Yousefi M, Yousofi Darani H. Toxoplasma gondii but Not Leishmania major or Trichomonas vaginalis decreases cell proliferation and increases cell death on fibrosarcoma cancer cells in culture medium. World J Vaccines 2012; 2(2): 105-8.
  16. Darani HY, Shirzad H, Mansoori F, Zabardast N, Mahmoodzadeh M. Effects of Toxoplasma gondii and Toxocara canis antigens on WEHI-164 fibrosarcoma growth in a mouse model. Korean J Parasitol 2009; 47(2): 175-7.
  17. Sharafi SM, Shirzad H, Khanahmad H, Ataei B, Darani HY. monoclonal antibodies production against a 40KDa band of hydatid cyst fluid. Recent Pat Biotechnol 2018; 12(1): 57-64.
  18. Sharafi S, Rafiei R, Rafiei R, Hadipour M, Shirzad H, Khanahmad H, Darani HA. Nonglycosylated 27 KDa molecule as common antigen between human breast cancer and Echinococcus granulosus hydatid cyst wall. Adv Breast Cancer Res 2016: 5(2): 90-5.
  19. Casaravilla C, Malgor R, Carmona C. Characterization of carbohydrates of adult Echinococcus granulosus by lectin-binding analysis. J Parasitol 2003; 89(1): 57-61.
  20. Casaravilla C, Freire T, Malgor R, Medeiros A, Osinaga E, Carmona C. Mucin-type O-glycosylation in helminth parasites from major taxonomic groups: Evidence for widespread distribution of the Tn antigen (GalNAc-Ser/Thr) and identification of UDP-GalNAc:polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase activity. J Parasitol 2003; 89(4): 709-14.
  21. Ogilvie BM, Simpson E, Keller R. Tumour growth in nematode-infected animals. Lancet 1971; 1(7701): 678-80.
  22. Song T, Gan W, Chen J, Huang L, Yin H, He T, et al. Antibodies against Clonorchis sinensis LDH could cross-react with LDHB localizing on the plasma membrane of human hepatocarcinoma cell SMMC-7721 and induce apoptosis. Parasitol Res 2016; 115(4): 1595-603.
  23. Chari RV. Targeted cancer therapy: Conferring specificity to cytotoxic drugs. Acc Chem Res 2008; 41(1): 98-107.